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    殘留DNA提取試劑盒

    更新時間:2020-05-06      點擊次數:3414

    殘留DNA提取試劑盒(碘化納法) 

    殘留DNA提取試劑盒遵照中國藥典記載的碘化納法,適用于疫苗和治療用生物制品所含宿主細胞殘余DNA的提 取。

    殘留DNA提取試劑盒可以提取樣品中含有的極微量的DNA,回收率較高。

    DNA的提取操作時間為60-90 min。

    提取的DNA可以通過qPCR進行定量。

    ◆特點

    ● 遵照中國藥典登載的碘化納法

     ● 高回收率

    ● 單管操作(無需換管) ,耗時僅60-90 min

    ● 不需要苯酚和氯方等有機溶劑

    ● 兼容多種DNA *1 為使DNA檢測方法與標準保持同步,中國藥典(The Chinese Pharmacopoeia)宣布建立殘留細胞 *1 DNA檢測國家標準。碘化納法將作為殘留DNA提取方法,被新增至2020版的中國藥典中。

    ◆原理 1. 使樣品中的蛋白質和脂質溶于碘化納和N-月桂基肌氨酸鈉; 2. 異丙醇與糖原選擇性地共沉淀DNA。

     

    ◆使用方法

     

    方法1 

    應用實例 DNA spiking test(加標回收實驗) 

     

    DNA Extractor™ Kit可以高產量提取殘留DNA,甚至少量殘留DNA。 

     

    上海起發Ivy Fine Chemicals B48202現貨

    貨號品名規格品牌
    B48202100L Glycogen Solution;1 mL Detergent Combo Solution;25 mL Sodium Iodide Solution;30 mLWashing Buffer (No Ethanol)DNA提取器試劑盒 kit  Ivy Fine Chemicals

     

    Ivy Fine Chemicals Corporation,

    目錄號B48202,50 次浸提,

    4 ℃ 下可穩定儲存 2 年

    僅供實驗室使用

     

    溶液制備:

    向清洗緩沖液中加入 70 mL 乙醇,

    向碘化納溶液中加入 50 L 糖原

    向清洗緩沖液中加入 2 L 糖原

     

    DNA 提取程序:

    向 2 mL 微量離心管中加入 500 L 各樣品或稀釋液

    向各試管中加入 20 L 清潔劑組合溶液,并輕輕渦旋

    • 選項:如果高濃度的蛋白質干擾 DNA 提取和隨后的 DNA 分析,每個樣品用 20 L 蛋白酶 K (10 mg/mL) 在 60 C 消化 20 min,然后在 95 C 滅活酶 5 min

    向各微量離心管中加入 500 L 碘化納溶液,輕輕渦旋

    在 50 ℃ 下孵育 10 min

    加入 900 L 異丙醇并渦旋。

    室溫下孵育 30 min

    以 12000 rpm 離心 15 min

    輕輕倒出或吸取上清液

    加入 1.8 mL 洗滌緩沖液(含乙醇)并渦旋

    以 12000 rpm 離心 10 min

    輕輕倒出或吸取上清液

    風干 DNA

    加入 20-60 L 水,輕輕渦旋溶解 DNA

    純化的 DNA 可通過 PCR、real time PCR、限制性內切酶切、DNA 測序、Picogreen 熒光染色進行分析

    流程圖:

     

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